產(chǎn)品介紹：
利用我們的創(chuàng )新和專(zhuān)有的脂質(zhì)體共軛結合技術(shù)，專(zhuān)門(mén)設計和配制了LipoD293? (Ver. II)轉染試劑，它添加了專(zhuān)有的增強劑促進(jìn)HEK293細胞和其它的哺乳動(dòng)物細胞的轉染。作為DNA轉染試劑的第二代脂質(zhì)體產(chǎn)品，對HEK293相關(guān)細胞和其它哺乳動(dòng)物細胞，
LipoD293? (Ver. II)轉染試劑提供了極高的轉染效率，并且細胞毒性
低。LipoD293? (Ver. II)轉染試劑，通過(guò)加入轉染增強肽的方式，使基因轉
染效率提高了3～4倍。LipoD293?(Ver.
II)轉染試劑，1.0ml，能在24孔板中足夠完成666次轉染，在6孔板中足夠完成333次轉染。
圖 1. 示意圖說(shuō)明LipoD293?轉染試劑(升級版)增強轉染的原理。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
– 難轉染細胞的最佳選擇
– 產(chǎn)生高滴度的病毒
– 對長(cháng)DNA片段同樣有效(最長(cháng)可達180kb)
– 對懸浮293細胞同樣有效(例如293F, 293H等)
– 產(chǎn)生高
水平的重組蛋白
– 血清和抗體不影響轉染效率
– 對單DNA和多DNA片段的共轉染特別有效
– 物美價(jià)廉
儲存條件：
40C儲存。若儲藏合適，產(chǎn)品的穩定性能保持12個(gè)月以上。
LipoD293?體外DNA轉染試劑(升級版)與市場(chǎng)主導品牌產(chǎn)品轉染效率的比較。
LipoD293?試劑(升級版)、lipofectamine
2000 (L2K)和Fugene HD對HepG2細胞轉染效率的比較。右圖：使用以上轉染試劑將GFP的cDNA
(pEGFP-N3)按照生產(chǎn)商的提供的轉染步驟轉染到HepG2細胞
(在膠原預處理的培養皿中培養）。在轉染48小時(shí)之后，用流式細胞儀檢測GFP陽(yáng)性細胞(%)和熒光強度。左圖：血清和抗生素存在的條件下能提高LipoD293試劑(升級版)對在HepG2細胞的轉染效率。通過(guò)三種不同的條件下轉染HepG2細胞(生長(cháng)在膠原處理的培養皿上)
—無(wú)血清和抗生素，10%血清和抗生素的存在，轉染5小時(shí)后換液和不換液。
LipoD293?試劑(升級版)，Lipofectamine
2000 (L2K), TransIT和Fugene
6對CHO細胞轉染效率的比較。右圖：使用以上轉染試劑將編碼熒光素酶蛋白的cDNA
(phRL-CMV)和綠色熒光蛋白GFP的cDNA按照生產(chǎn)商的提供的轉染步驟分別轉染到CHO細胞。在轉染24小時(shí)后，熒光素酶的活性使用Beckman公司的化學(xué)發(fā)光監測器測定；GFP陽(yáng)性細胞率使用BD公司的FACS檢測。左圖：LipoD293試劑(升級版)和Lipofecatmine
2000 (L2K), TransIT以及Fugene
6的價(jià)格比較(美元/1000微升)。所有的價(jià)格是從生產(chǎn)制造商的網(wǎng)站上收集的。
LipoD293?試劑(升級版)和Lipofectamine
2000 (L2K)對在難轉染細胞(原代大鼠動(dòng)脈平滑肌細胞)的轉染效率的比較。制備大鼠的動(dòng)脈平滑肌原代細胞并用使用LipoD293?試劑(左圖)和Lipofecatmine
2000(L2K,右圖)分別將GFP的cDNA(pEGFP-N3)按照生產(chǎn)制造商的轉染操作步轉染至該細胞。轉染24小時(shí)后，用尼康Eclipse
2000 熒光顯微鏡檢測GFP熒光，以此來(lái)評價(jià)轉染效率。上面的圖片由芝加哥大學(xué)的肺和重癥護理系的Nickolai
Dulin博士友情提供的。
LipoD293?試劑和Fugene
HD對難轉染細胞LNCap細胞轉染效率的比較。LNCap細胞的培養和傳代嚴格由ATCC建議的操作步驟進(jìn)行，與pBabe-hygro-SSeCKs
(1.5ug)和pEGFP-N3
(1:1，共1.0 微克)共轉染(6孔板中每孔的量)，并用
LipoD293?試劑(左圖)和Fugene
HD (右圖)分別按照生產(chǎn)制造商的科學(xué)實(shí)驗步驟進(jìn)行轉染。轉染24小時(shí)后，用尼康Eclipse
2000 熒光顯微鏡檢測GFP熒光，以此來(lái)評價(jià)轉染效率。上面的圖片由羅斯威爾公園癌癥研究所(Roswell
Cancer Institute)的Lyn
Gao博士友情提供的。
LipoD293?試劑對難轉染細胞像HepG2和SaoS-2上出色的轉染效率。在血清和抗生素的存在下，HepG2和SaoS-2細胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分別轉染達到95%的細胞融合。轉染48小時(shí)后，分別通過(guò)Zeiss
510激光共聚焦顯微鏡和 β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測效率。
LipoD293?試劑和
293fectin對HEK293細胞轉染效率的比較。用LipoD293?體外DNA轉染試劑(Ver.
II)(上圖)和受歡迎的品牌產(chǎn)品Invitrogen公司的293fectin?(下圖)轉染pEGFP-C1質(zhì)粒到HEK293細胞中。轉染24小時(shí)后，細胞的尼康Eclipse熒光顯微鏡DIC成像圖(左側)和熒光成像圖(右側)。
LipoD293?試劑和
293fectin，Xfect和Fugene
6轉染試劑對懸浮HEK293F產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較。30毫升的293F細胞分別使用LipoD293?試劑、293fectin、Xfect和Fugene
6等轉染試劑按照生產(chǎn)商的標準轉染步驟將pEGFP-6xHis質(zhì)粒導入細胞表達，用量為LipoD293?試劑，20微克，所有其他三種轉染試劑均使用30微克質(zhì)粒DNA。轉染48小時(shí)后，使用尼康熒光顯微鏡GFP熒光進(jìn)行成像（左側四幅圖），A：LipoD293；B：293fectin；C：Xfect和D：Fugene 6.? 帶有6xHis標記的 GFP熒光蛋白使用Ni-NTA親和柱技術(shù)實(shí)現分離。5微升洗脫液載入SDS-PAGE凝膠電泳分離并進(jìn)行Coomassie亮藍染色(右上圖E)，道1為L(cháng)ipoD293293、道2為標準蛋白分子、道3為Xfect、道4為293fectin和道5為Fugene 6。這四種轉染試劑產(chǎn)生蛋白質(zhì)的效率被進(jìn)一步定量（見(jiàn)右下圖F）。
LipoD293?試劑(升級版)和Lipofecatmine
LTX (LTX)產(chǎn)生慢病毒的比較。通過(guò)LipoD293?試劑(升級版)和Lipofectamine
LTX (LTX)試劑將三個(gè)cDNAs共轉染進(jìn)293T細胞。一個(gè)GFP載體，pHR-SIN-cppt-CMVEWP被用來(lái)測定慢病毒的滴度。在24孔板中每孔加入1×10^5
293T細胞，其次是分別添加不同量的慢定都上清液，1
微升(上圖)和10微升(下圖)。5天后，細胞通過(guò)流式細胞儀檢測。右上角的數字表明轉導的細胞的百分比來(lái)測定慢病毒的滴度。由LipoD293?
and LTX產(chǎn)生的慢病毒的滴度被量化，分為是8×10^6和3×10^6tu/ml。
轉染試劑操作步驟及其使用指南
– LipoD293?試劑(升級版)哺乳動(dòng)物細胞轉染操作步驟 
–LipoD293?試劑(升級版)轉染操作步驟簡(jiǎn)化版
–LipoD293?試劑(升級版)懸浮293或CHO細胞生產(chǎn)重組蛋白質(zhì)轉染操作步驟
– LipoD293?試劑(升級版)生產(chǎn)慢病毒的轉染操作步驟
–LipoD293?試劑(升級版)生產(chǎn)重組腺相關(guān)病毒轉染操作步驟
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用戶(hù)評價(jià)：
I am absolutely thrilled with the LipoD293 transfection reagent! I
compared LipoD293 to Lipofectamine for transfection of plasmids to
generate viral pseudoparticles and WOW! I recovered 4 times more virus
using the LipoD293 reagent than Lipofectamine!! This is wonderful news
for me and my mentor as it means that I don’t have to spend so much
time (and resources) on transfecting 293T cells to recover virus for in
vitro experiments. My mentor was also very happy that LipoD293 costs
much less than Lipofectamine!! We have already ordered 5 mls of
LipoD293 and I have now convinced my lab mates to switch to LipoD293
since I got such good results with it. Thanks for making such a great
product!
——– Christy Lavine, Ph.D., Harvard University
I wanted to update you on the free sample of LipoD293 that you sent to
us. I recently transfected some Plat-E’s side-by-side with
Lipofectamine 2000, and your product out-performed it!!! We are also
validating it with HeLa cells, but otherwise we are VERY happy with
what we have seen thus far! Thank you for sending us the free sample,
it definately made the SALE for us!
——–Catherine Gallo, Ph.D., University of Cincinnati
we have now tried the LipoD293 DNA In Vitro transfection reagent on
293FT cells. In the first flask we used the protocol by Invitrogen
provided in theVirapower box insert (Virapower, pBABE-GFP plasmid, plus
Lipofectamine). In the second flask we used LipoD293 (30 ul/6ml media)
with the same amounts of Virapower and plasmid as in the first flask.
The results were stunning:LipoD293 gave twice as many transformants as
Lipofectamine 2000…
——– A Beta Tester from Wayne State University
