產(chǎn)品介紹：
基于我們專(zhuān)有的高分子聚合物合成技術(shù)，PolyJet?體外DNA轉染試劑是一種可生物降解的高分子聚合物的DNA轉染試劑。它能對 HEK293, COS-7,
NIH-3T3, HeLa，
CHO細胞以及更廣范圍難轉染的哺乳細胞，確保高效、可重復性的轉染結果。室溫下，PolyJet?
試劑在一個(gè)非常低的濃度，能固定DNA在電泳過(guò)程中的遷移，并在5分鐘之內形成轉染復合物。該試劑的一個(gè)顯著(zhù)特征是在轉染復合物內吞之后能快速完全降解掉，細胞毒性低。PolyJet?
試劑，1.0ml，能在24孔板中足夠完成600-1200次轉染，或者在6孔板中足夠完成300-600次轉染，是用于各種常用細胞系和難以轉染的哺乳動(dòng)物細胞系的一個(gè)價(jià)格優(yōu)惠的替代產(chǎn)品。
Figure 1. A Cartoon Showing Biodegradation of PolyJet? DNA Transfection Reagent
After Endocytosis of Transfection Complex
產(chǎn)品特點(diǎn)：
– 細胞內吞之后能生物降解
– 產(chǎn)生高滴度的病毒
– 對長(cháng)DNA片段(>89kb)同樣有效
– 對單個(gè)DNA片段的轉染和多個(gè)DNA片段的共轉染同樣有效
– 產(chǎn)生高水平的重組蛋白
– 轉染步驟簡(jiǎn)單
– 價(jià)格優(yōu)惠，物美價(jià)廉
儲存條件：
40C儲存。若儲藏合適，產(chǎn)品的穩定性能保持24個(gè)月以上。
PolyJet?體外DNA轉染試劑具有極廣譜的轉染活性。
| 細胞系 |
轉染效率 (% GFP) |
細胞系 |
轉染效率 (% GFP) |
McArdle 7777
Hep3D
SHEP
3T3-442A
COS-7
CV-1
D 407
DHD Pro.b
3LL
B16-F10
BAEC
BHK-21
Ca Ski
CaCo2
CHO
HCS-2/8
HEK-293
HeLa
HLMEC
H-MVEC
Huh-7D12
ATT20
SK-N-SH
C2C12
HepG2 |
65-70%
67-76%
68-71%
35%
85-90%
60%
70%
70%
80%
85%
51%
80%
88%
60%
88%
61%
86%
88%
72%
59%
72%
46%
29%
46%
72% |
SAOS-2
SN56
MC3T3-E1
Primary melanocyte
K562
L929
MCF-7
MDCK
Neuro2A
NIH 3T3
PC12
SH-SY5Y
SiHa
SKOV3
Huh-7
IGROV1
DF-1, Chicken Embryonic Cell
6CSFMEo
WEHI 231
A549
LNCap
Prim. mouse keratinocyte
Prim. human skin fibroblast
Prim. human pre-adipocyte
Prim. mouse embry. fibroblast |
58%
81%
80%
35%
38%
59%
68%
68%
86%
76%
50%
25%
60%
65%
70%
35%
50%
71%
26%
75%
75
29%
50%
32%
30% |
實(shí)例說(shuō)明PolyJet?體外DNA轉染試劑對常見(jiàn)細胞系優(yōu)異的轉染效率。
PolyJet?轉染試劑和lipofectamine
Plus轉染試劑對中國倉鼠卵巢(CHO)細胞轉染效率的比較。分別使用PolyJet?
(左圖)和lipofectamine Plus (右圖)將HA標記的β-微管蛋白cDNA轉染入中國倉鼠卵巢細胞。異硫氰酸熒光素(FITC)標記的抗HA標記的抗體被用來(lái)結合HA-β-微管蛋白(綠色)，DM1a抗體被用來(lái)檢測內源性的β-微管蛋白,它連接著(zhù)羅丹明標記的二抗(紅色)探針。上述圖片是由德克薩斯州休斯頓醫學(xué)院(University
of Texas at Houston Medical School)的Dr. Shang Yin友情提供的。
PolyJet?試劑和一款領(lǐng)先產(chǎn)品Lipofectamine
2000對HEK293FT細胞染效率的比較。分別使用PolyJet?(左圖)和Lipofectamine
2000(右圖)將GFP載體(pEGFP-N3)轉染入HEK-293FT細胞。轉染24小時(shí)后，通過(guò)尼康Eclipse熒光顯微鏡檢查細胞的轉染效率。
PolyJet? 試劑和市場(chǎng)主導品牌產(chǎn)品Lipofectamine
2000對HepG2細胞轉染效率的比較。分別使用PolyJet?
(左圖)和Lipofectamine 2000(右圖)將GFP載體(pEGFP-N3)轉染入HepG2 細胞。轉染24小時(shí)后，通過(guò)尼康Eclipse熒光顯微鏡檢查細胞的轉染效率。
PolyJet?和Fugene HD對MDCK細胞染效率的比較。分別使用PolyJet?(左圖)和Fugene
HD (右圖)按照生產(chǎn)制造商的科學(xué)實(shí)驗步驟將綠色熒光蛋白(GFP)DNA轉導入MDCK細胞。轉染48小時(shí)后，在熒光顯微鏡下觀(guān)察GFP和DAPI染色。上面的圖片是由NYU醫學(xué)中心的Ge
Zhou博士友情提供的。
PolyJet?試劑和市場(chǎng)主導品牌產(chǎn)品Lipofectamine
2000對MDCK細胞轉染效率的比較。MDCK細胞是較難轉染的細胞系。使用我們專(zhuān)有的細胞轉染操作程序，PolyJet?
(左圖)能高達70% GFP陽(yáng)性細胞對比Lipofectamine 2000 (右圖)大約 5%的陽(yáng)性效率。分別使用由PolyJet?
(左圖)和Lipofectamine 2000 (右圖)將GFP載體(pEGFP-N3)轉染入MDCK細胞。轉染36小時(shí)后,通過(guò)尼康Eclipse熒光顯微鏡檢查轉染效率。
PolyJet?試劑同市場(chǎng)主導品牌產(chǎn)品之一Fugene
HD對LNCap細胞轉染效率的比較。分別使用PolyJet?
(左圖)和Fugene HD(右圖)將GFP載體(pEGFP-N3)轉染入LNCap細胞。轉染24小時(shí)后,通過(guò)尼康Eclipse熒光顯微鏡檢查轉染效率。
PolyJet?試劑對神經(jīng)細胞系Neuro2A有較高的轉染效率。使用PolyJet?體外DNA轉染試劑將pEGFP-C1質(zhì)粒轉染入Neuro2A細胞。轉染24小時(shí)后,通過(guò)尼康Eclipse熒光顯微鏡觀(guān)察Neuro2A細胞的DIC影像(左)和熒光影像(右)。
PolyJet?
DNA體外轉染試劑和Lipofectamine 2000在原代小鼠皮膚成纖維細胞上的細胞毒性的比較。小鼠成纖維細胞與指定的轉染試劑/pEGFP-C1
(DNA)混合物在無(wú)血清DMEM高糖培養基孵育4小時(shí),然后用全血清培養基替代。轉染24小時(shí)后,細胞的尼康Eclipse熒光顯微鏡DIC相位成像圖。
轉染試劑操作步驟及其使用指南
– 一般性哺乳動(dòng)物細胞轉染操作步驟 
– 簡(jiǎn)易轉染操作步驟(適合熟練操作者) 
– 懸浮293和CHO細胞轉染操作步驟
– 對難轉哺乳動(dòng)物細胞轉染操作步驟
– 包裝慢病毒轉染操作步驟
– 包裝重組腺相關(guān)病毒轉染操作步驟
–?注意事項及轉染竅門(mén)
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用戶(hù)評價(jià)：
PolyJet Transfection Reagent worked equally as well as lipofectamine 2000, with little evidence of cell death on 293, PC-3 and 22RV1 cells. I will defiantly consider switching over.
—–Tiffany Wallace, Ph.D., June 9, 2009, NCI / NIH
I only did side by side with the testing sample (PolyJet) and Lipo2000 with GFP transfection on COS-7 cells. The result was very good. PolyJet was even better than L2K.
——Feng Qiao, Ph.D., Jun 12, 2009, NEI / NIH
I tested the sample of PolyJet on my NIH-3T3 mouse fibroblasts this weekend. The results were much better than Lipofecatmine LTX. I’m attaching a powerpoint slide with my results (I did not quantify the % transfection efficiency, but the pictures get the point across). I found that the protocol for difficult-to-transfect cell lines worked better than the standard protocol.
—–Stephanie Murphy, Ph.D., June 29, 2009, Dartmouth College
I had chance to try your product finally. It was great success. I used HeLa cells and got 10% transfection efficiency (<0.1% for Lipofectamine). Thank you! I was wondering if I also try GenJet? Plus DNA In Vitro Transfection Reagent? According to your website, the reagent works better than regular PolyJet.
——-Yumi Uetake, Ph.D., August11, 2009, UMASS
I tested PolyJet and it looks great on MDCK. We placed order. Thank you!
——-Ge Zhou, Ph.D., August 12, 2009, NYU
We are happy to provide feedback. PolyJet worked very well for us in HepG2 cells, we got approximately 80% efficiency with pMAX GFP plasmid, by following the conditions in your suggested protocol. We ran a comparison with Lipofectamine, which only showed approximately 20-30% transfection efficiency. We are planning experiments and will be ordering more soon.
——-Emily Mcallister, September 3rd, 2009, PBRC
